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  • 【知识科普】核酸提取的常用方法及原理

    目前常用的核酸提取方法有两种:一种是柱式提取,另一种是磁珠法提取。其中自动化提取的实现主要依赖于磁珠法。


    柱式提取是用于微量核酸提取的较为简单的方法,属于硅吸附方法的一种,市场上的离心柱虽各有特色,但在原理上通常可分为三个部分:

    (1)利用裂解液促使细胞破碎,使细胞中的核酸释放出来。

    (2)把释放出的核酸特异地吸附在特定的硅载体上,这种载体只对核酸有较强的亲和力和吸附力,对其他生化成分如蛋白质、多糖、脂类则基本不吸附,因而在离心时被甩出柱子。

    (3)把吸附在特异载体上的核酸用洗脱液洗脱下来,分离得到纯化的核酸。


    (柱式法图解)


    磁珠法提取运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性,在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下,能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA和RNA分离出来,可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。



    (机器自动化磁珠法图解)